TaoTaoLeo
男, 28岁
浙江 杭州
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2009年02月02日 星期一 20:24
Excel提供的单元信息函数——Cell函数,它能够返回某一引用区域左上角单元格的格式、位置或内容,以及文件所在路径等信息,也是Excel内置函数中为数不多的可以返回单元格属性的函数之一。
此函数的完整语法是
CELL(info_type,reference)
其中info_type的参数值很多,常用的有
=CELL("Filename",reference)返回reference所在工作表名;如果reference省略,返回活动工作表名(含完整文件路径)。使用此参数,要求工作簿必须已保存。
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2009年02月02日 星期一 20:09
1、Substitute(text,old_text,new_text,instance_num) 将目标文本中指定的字符串替换为新字符
2、 Replace(old_text,start_num,num_chars,new_text) 主要用于根据起始位置和文本字符数来替换为指定的新字符(串)
下面这个太Orz了
从零件规格号中提取出末段序号
如BT40-W87-0976-T123 中提取出T123
=REPLACE(C2,1,FIND("@",SUBSTITUTE(C2,"-","@",LEN(C2)-LEN(SUBSTITUTE(C2,"-","")))),"")
思路:
(1)首先取得末段序号必须确定T123前的最后一个“-“位置
(2)取得最后一个“-”,需要将其替换为特殊字符便于FIND函数查找
(3)要替换最后的“-”,就要统计规格号中的“-“的数量。
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2009年02月02日 星期一 19:39
1、将光标定位到G2单元格;
2、按下<ctrl+F3>组合键,打开“定义名称”对话框;
3、为“在当前工作簿的名称“下的文本框中添加一个新的名称“End“;
4、在“引用位置”下的编辑框中输入引用,由于使用“相对引用”G2左侧前一个单元格,因此输入“=F2“
5、单击“添加”按钮新增名称,再单击“确定”按钮返回。
名称定义好之后,只要修改原来的公式为:=SUM(B2:End)
使用offset函数结合COUNTA函数来产生动态引用的用法在实际工作中使用得比较频繁,特别在数组公式和绘制动态图表中也被广泛使用。 |
2009年01月22日 星期四 19:21
合计问题(已经困扰我几个月了)
厂商合约号 合约金额
4510007952 10,000.00
4510007952 10,000.00
4510007952 10,000.00
4510008296 5,000.00
4510007952 10,000.00
4510008296 5,000.00
4510007952 10,000.00
请教各位高人大虾,以上合约我要是想合计的话怎么处理.
统计合约总金额,一样合计为一项,不同合约的金额合计.
以上的金额合计应该是15000
我应该怎么处理,谢谢.
各位大哥,说明一下,我这个文档里的重复项是不能删除的.
有没有办法用公式的方法来处理掉!谢谢
答案:
=SUMPRODUCT(1/COUNTIF(C2:C8,C2:C8)*D2:D8)
还有:=SUMPRODUCT(D2:D8/COUNTIF(C2:C8,C2:C8))
解释:公式:COUNTIF(C$2:C19,C$2:C19)的结果如下:
{1;1;1;1;1;1;1;1;2;1;1;2;1;2;1;2;1;1}
1/COUNTIF(C$2:C19,C$2:C19)的结果如下:
{1;1;1;1;1;1;1;1;0.5;1;1;0.5;1;0.5;1;0.5;1;1} 把它理解成:如果只有一个值,占的比例为100%,即1;如果有2 个,每个占的比例为:1/2,即0.5,……
D$2:D19/COUNTIF(C$2:C19,C$2:C19) 理解成:每个值按照自己重复次数的比例取值。
=SUMPRODUCT(D$2:D19/COUNTIF(C$2:C19,C$2:C19)) 就是把乘积加起来而已(因为只有一个数组,SUMPRODUCT相当于加)
这样,数值中虽然有重复,但由于各自只取了:1/重复次数的值,因为加起来相当于只取了1个100%。值不会被重复算。
还不懂的话,请问:1/2+1/2=? 1/3+1/3+1/3=? ……
超强啊!!!
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2009年01月19日 星期一 16:02
=AVERAGE(INDIRECT("原始数据!"&ADDRESS(ROW()*5-1,COLUMN(),4,TRUE,)&":"&ADDRESS(ROW()*5+3,COLUMN(),4,TRUE,)))
下午为了从原始数据里几千个数字里“淘”出自己要的连续5个数字的平均值来,花了不少工夫。 |
2008年11月10日 星期一 21:47
这几天看了几本同学的笔记有感
像我这样心浮气燥的人肯定做不出来的
好好学啊!
又想起三多和成才了。 |
2008年08月12日 星期二 12:42
啊,体育,
天神的欢娱,生命的动力。
你淬然降临在灰蒙蒙的林间空地,
受难者激动不已。
你像是容光焕发的使者,
向暮年人微笑致意。
你像高山之巅出现的晨曦。
照亮了昏暗的大地。
啊,体育,你就是美丽!
你塑造的人体变得高尚还是卑鄙,
要看它是被可耻的欲望引向堕落;
还是由健康的力量悉心培育。
没有匀称协调,便谈不上什么美丽。
你的作用无与伦比,
可使三者和谐统一;
可使人体运动富有节律;
使动作变得优美,
柔中会有刚毅。
啊,体育,你就是正义!
你体现了社会生活中追求不到的公平合理。
任何人不可超过速度一分一秒,
逾越高度一分一厘。
取得成功的关键,
只能是体力与精神融为一体。
啊,体育,你就是勇气!
肌肉用力的全部含义是敢于搏击。
若不为此,敏捷、强健有何用?
肌肉发达有何益?
我们所说的勇气,
不是冒险家押上全部赌注似的蛮干,
而是经过慎重的深思熟虑。
啊,体育,你就是荣誉!
荣誉的赢得要公正无私,
反之便毫无意义。
有人耍弄见不得人的诡计,
以此达到欺骗同伴的目的,
他内心深处却受着耻辱的绞缢。
有朝一日被人识破,就会落得名声扫地。
啊,体育,你就是乐趣!
想起你,内心充满欢喜,
血液循环加剧,思路更加开阔,
条理愈加清晰。
你可使忧伤的人散心解闷,
你可使欢乐的人生活更加甜蜜。
啊,体育,你就是培育人类的沃地。
你通过最直接的途径,
增强民族体质矫正畸形躯体,
防病患于未然
使运动员得到启迪:
希望后代长得茁壮有力,
继往开来,夺取桂冠的胜利。
啊,体育,你就是进步!
为人类的日新月异,
身体和精神的改变要同时抓起,
你规定良好的生活习惯,
要求人们对过度行为引起警惕。
你告诫人们遵守规则,
发挥人类最大能力,
而又无损健康的肌体。
啊,体育,你就是和平,
你在各民族间建立愉快的联系。
你在有节制、有组织、有技艺的体力较量中产生,
让全世界的青年学会相互尊重和学习,
使不同民族特质成为高尚而和平竞赛的动力。 |
2008年07月16日 星期三 18:33
生命是一种长期而持续的累积过程
----节录自台湾清华大学电机系彭明辉老师发表的文章
许多同学应该都还记得联考前夕的焦虑:差一分可能要掉好几个志愿,甚至于一生的命运从此改观!到了大四,这种焦虑可能更强烈而复杂:到底要先当兵,就业,还是先考研究所?我就经常碰到学生充满焦虑的问我这些问题。
可是,这些焦虑实在是莫须有的!生命是一种长期而持续的累积过程,绝不会因为单一的事件而毁了一个人的一生,也不会因为单一的事件而救了一个人的一生。属于我们该得的,迟早会得到;属于我们不该得的,即使侥幸巧取也不可能长久保有。如果我们看清这个事实,许多所谓" 人生的重大抉择" 就可以淡然处之,根本无需焦虑。而所谓"人生的困境",也往往当下就变得无足挂齿。我自己就是一个活生生的例子。从一进大学就决定不再念研究所,所以,大学四年的时间多半在念人文科学的东西。毕业后工作了几年,才决定要念研究所。硕士毕业后,立下决心:从此不再为文凭而念书。
谁知道,世事难料,当了五年讲师后,我又被时势所迫,整装出国念博士。出国时,一位大学同学笑我:全班最晚念博士的都要回国了,你现在才要出去?两年后我从剑桥回来,觉得人生际遇无常,莫此为甚:一个从大一就决定再也不钻营学位的人,竟然连硕士和博士都拿到了!属于我们该得的,哪样曾经少过?而人生中该得与不该得的究竟有多少,我们又何曾知晓?从此我对际遇一事不能不更加淡然。当讲师期间,有些态度较极端的学生会当面表现出他们的不屑;从剑桥回来时,却被学生当做不得了的事看待。这种表面上的大起大落,其实都是好事者之言,完全看不到事实的真相。从表面上看来,两年就拿到剑桥博士,这好像很了不起。但是,在这" 两年"之前我已经花整整一年,将研究主题有关的论文全部看完,并找出研究方向;而之前更已花三年时间做控制方面的研究,并且在国际著名的学术期刊中发表论文。而从硕士毕业到拿博士,期间七年的时间我从不停止过研究与自修。所以,这个博士其实是累积了七年的成果,或者,只算我花在控制学门的时间,也至少有五年,根本也没什么好惊讶的。常人不从长期而持续的累积过程来看待生命因积蓄而有的成果,老爱在表面上以断裂而孤立的事件夸大议论,因此每每在平淡无奇的事件上强做悲喜。可是对我来讲,当讲师期间被学生瞧不起,以及剑桥刚回来时被同学夸大本事,都只是表象。事实是:我只在乎每天二十四小时点点滴滴的累积。拿硕士或博士只是特定时刻里这些成果累积的外在展示而已,人生命中真实的累积从不曾因这些事件而终止或加添。常有学生满怀忧虑的问我:" 老师,我很想先当完兵,工作一两年再考研究所。这样好吗?"很好,这样子有机会先用实务来印证学理,你念研究所时会比别人了解自己要的是什么。"
"可是,我怕当完兵又工作后,会失去斗志,因此考不上研究所。"
"那你就先考研究所好了。"
"可是,假如我先念研究所,我怕自己又会像念大学时一样茫然,因此念的不甘不愿的。"
"那你还是先去工作好了。"
"可是……"
我完全可以体会到他们的焦虑,可是却无法压抑住对于这种话的感慨。其实,说穿了他所需要的就是两年研究所加两年工作,以便加深知识的深广度和获取实务经验。先工作或先升学,表面上大相径庭,其实骨子里的差别根本可以忽略。在" 朝三暮四"这个成语故事里,主人原本喂养猴子的橡实是"早上四颗下午三颗",后来改为"朝三暮四",猴子就不高兴而坚持改回到"朝四暮三" 。其实,先工作或先升学,期间差异就有如"朝三暮四"与"朝四暮三",原不值得计较。但是,我们经常看不到这种生命过程中长远而持续的累积,老爱将一时际遇中的小差别夸大到攸关生死的地步。
最讽刺的是:当我们面对两个可能的方案,而焦虑的不知何所抉择时,通常表示这两个方案可能一样好,或者一样坏,因而实际上选择哪个都一样,唯一的差别只是先后之序而已。而且,愈是让我们焦虑得厉害的,其实差别越小,愈不值得焦虑。反而真正有明显的好坏差别时,我们轻易的就知道该怎么做了。可是我们却经常看不到长远的将来,短视的盯著两案短期内的得失:想选甲案,就舍不得乙案的好处;想选乙案,又舍不得甲案的好处。如果看得够远,人生常则八,九十,短则五,六十年,先做哪一件事又有什么关系?甚至当完兵又工作后,再花一整年准备研究所,又有什么了不起?当然,有些人还是会忧虑说:" 我当完兵又工作后,会不会因为家累或记忆力衰退而比较难考上研究所?"我只能这样回答:"一个人考不上研究所,只有两个可能:或者他不够聪明,或者他的确够聪明。不够聪明而考不上,那也没什么好抱怨的。假如你够聪明,还考不上研究所,那只能说你的决心不够强。假如你是决心不够强,就表示你生命中还有其他的可能性,其重要程度并不下于硕士学位,而你舍不得丢下他。既然如此,考不上研究所也无须感到遗憾。不是吗?"
人生的路这么多,为什么要老斤斤计较着一个可能性?我高中最要好的朋友,一生背运:高中考两次,高一念两次,大学又考两次,甚至连机车驾照都考两次。毕业后,他告诉自己:我没有人脉,也没有学历,只能靠加倍的诚恳和努力。现在,他自己拥有一家公司,年收入数千万。一个人在升学过程中不顺利,而在事业上顺利,这是常见的事。有才华的人,不会因为被名校拒绝而连带失去他的才华,只不过要另外找适合他表现的场所而已。反过来,一个人在升学过程中太顺利,也难免因而放不下身段去创业,而只能乖乖领薪水过活。福祸如何,谁能全面知晓?我们又有什么好得意?又有什么好忧虑?人生的得与失,有时候怎么也说不清楚,有时候却再简单不过了:我们得到平日累积的成果,而失去我们不曾努力累积的!所以重要的不是和别人比成就,而是努力去做自己想做的。功不唐捐,最后该得到的不会少你一分,不该得到的也不会多你一分。
好像是前年的时候,我在往艺术中心的路上遇到一位高中同学。他在南加大当电机系的副教授,被清华电机聘回来开短期课程。从高中时代他就很用功,以第一志愿上台大电机后,四年都拿书卷奖,相信他在专业上的研究也已卓然有成。回想高中入学时,我们两个人的智力测验成绩分居全学年第一,第二名。可是从高一我就不曾放弃自己喜欢的文学,音乐,书法,艺术和哲学,而他却始终不曾分心,因此两个人在学术上的差距只会愈来愈远。反过来说,这十几二十年我在人文领域所获得的满足,恐怕已远非他所能理解的了。我太太问过我,如果我肯全心专注于一个研究领域,是不是至少会赶上这位同学的成就?我不这样想,两个不同性情的人,注定要走两条不同的路。不该得的东西,我们注定是得不到的,随随便便拿两个人来比,只看到他所得到的,却看不到他所失去的,这有什么意义?
有次清华电台访问我:"老师你如何面对你人生中的困境?"我当场愣在那里,怎么样都想不出我这一生什么时候有过困境!后来仔细回想,才发现:我不是没有过困境,而是被常人当作"困境"的境遇,我都当作一时的际遇,不曾在意过而已。刚服完兵役时,长子已出生却还找不到工作。我曾焦虑过,却又觉得迟早会有工作,报酬也不至于低的离谱,不曾太放在心上。念硕士期间,家计全靠太太,生活亦算不上困境。一来,精神上我过的很充实,二来我知道这一切是为了让自己有机会转行。得知剑桥要求的有多严,却不曾丧气。因为,我知道自己过去一直很努力,也有很满意的心得和成果,只不过别人看不到而已。我没有过困境,因为我从不在乎外在的得失,也不武断的和别人比高下,而只在乎自己内在真实的累积。
我没有过困境,因为我确实了解到:生命是一种长期而持续的累积过程,绝不会因为单一的事件而有剧烈的起伏。同时我也相信:属于我们该得的,迟早会得到;属于我们不该得的,即使一分也不可能加增。假如你可以持有相同的信念,那么人生于你也会是宽广而长远,没有什么了不得的"困境",也没有什么好焦虑的了。 |
2008年07月13日 星期日 18:35
现在在睡觉前经常拿起来翻一翻,从中汲取营养和动力
在先辈面前,我们的付出和痛苦,又算得了什么呢? |
2008年07月13日 星期日 18:34
实验做得最累的时候,我一遍又一遍地在心里念着这句话!
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2008年07月06日 星期日 23:29
miRIDIAN microRNA模拟物和阻遏物是否可以用于体内实验研究(如通过小鼠尾静脉注射)?
下面是两篇报道了体内使用miRNA阻遏物产品的文献,可供研究者参考:
1) Krützfeldt, JN, et al. Silencing of microRNAs in vivo with 'antagomirs'. Nature. 2005, 438(7068):685-9.
2) Christine Esau, et al. miR-122 regulation of lipid metabolism revealed by in vivo antisense targeting. Cell Metab. 2006, 3 (2):87-98.
microRNA模拟物和阻遏物相关参考文献推荐
参考文献推荐:
1. Kato M, Zhang J, Wang M, et al. MicroRNA-192 in diabetic kidney glomeruli and its function in TGF-beta-induced collagen expression via inhibition of E-box repressors. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007, 27; 104(9):3432-7.
2. Plaisance V, Abderrahmani A, Perret-Menoud V, et al. MicroRNA-9 controls the expression of Granuphilin/Slp4 and the secretory response of insulin-producing cells. J Biol Chem. 2006, 15; 281(37):26932-42.
3. Karginov FV, Conaco C, Xuan Z, et al. A biochemical approach to identifying microRNA targets. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007, 4; 104(49):19291-6.
4. Volinia S, Calin GA, Liu CG, et al. A microRNA expression signature of human solid tumors defines cancer gene targets. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006, 14;103(7):2257-61.
5. Raveche ES, Salerno E, Scaglione BJ, et al. Abnormal microRNA-16 locus with synteny to human 13q14 linked to CLL in NZB mice. Blood. 2007, 15; 109(12):5079-86.
6. Lu S, Cullen BR. Adenovirus VA1 noncoding RNA can inhibit small interfering RNA and MicroRNA biogenesis. J Virol. 2004 Dec;78(23):12868-76.
7. Elmén J, Lindow M, Silahtaroglu A, et al. Antagonism of microRNA-122 in mice by systemically administered LNA-antimiR leads to up-regulation of a large set of predicted target mRNAs in the liver. Nucleic Acids Res. 2007 Dec 23 [Epub ahead of print]
8. Lee YS, Kim HK, Chung S, et al. Depletion of human micro-RNA miR-125b reveals that it is critical for the proliferation of differentiated cells but not for the down-regulation of putative targets during differentiation. J Biol Chem. 2005, 29; 280(17):16635-41.
9. Jiang F, Ye X, Liu X, et al. Dicer-1 and R3D1-L catalyze microRNA maturation in Drosophila. Genes Dev. 2005, 15; 19(14):1674-9.
10. Suárez Y, Fernández-Hernando C, Pober JS, et al. Dicer dependent microRNAs regulate gene expression and functions in human endothelial cells. Circ Res. 2007, 27;100(8):1164-73.
11. Yu Z, Raabe T, Hecht NB. MicroRNA Mirn122a reduces expression of the posttranscriptionally regulated germ cell transition protein 2 (Tnp2) messenger RNA (mRNA) by mRNA cleavage. Biol Reprod. 2005 Sep; 73(3):427-33.
12. Tsuchiya Y, Nakajima M, Takagi S, et al. MicroRNA regulates the expression of human cytochrome P450 1B1. Cancer Res. 2006 Sep 15; 66(18):9090-8.
13. Chellappan P, Vanitharani R, Fauquet CM. MicroRNA-binding viral protein interferes with Arabidopsis development. Proc Natl Acad Sci U S A. 2005,19;102(29):10381-6.
14. Kim HK, Lee YS, Sivaprasad U, et al. Muscle-specific microRNA miR-206 promotes muscle differentiation. J Cell Biol. 2006, 28; 174(5):677-87.
15. Meister G, Landthaler M, Dorsett Y, et al. Sequence-specific inhibition of microRNA- and siRNA-induced RNA silencing. RNA. 2004, 10(3):544-50.
16. Farh KK, Grimson A, Jan C, et al. The widespread impact of mammalian MicroRNAs on mRNA repression and evolution. Science. 2005, 16;310(5755):1817-21.
17. Linsley PS, Schelter J, Burchard J, et al. Transcripts targeted by the microRNA-16 family cooperatively regulate cell cycle progression. Mol Cell Biol. 2007, 27(6):2240-52.
18. Chapman EJ, Prokhnevsky AI, Gopinath K, et al. Viral RNA silencing suppressors inhibit the microRNA pathway at an intermediate step. Genes Dev. 2004, 15; 18(10):1179-86.
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2008年06月16日 星期一 22:16
2008欧洲杯最后一轮,A组,土耳其VS捷克,赛前出现了戏剧性的情况就是如果两队踢平的话,不得不以点球的方式决出最后一个出线名额。不过说实话,比起死亡之组那三场重量级的比赛,这场比赛对大部分球迷来说,吸引力不算太大,加之北京时间2:45才开球,只有铁杆球迷才会放弃宝贵的睡眠关注这场比赛。
恭喜这些球迷,他们看到了这届欧洲杯到现在为止最精彩的一场比赛。
0:2落后,只剩15分钟,伤兵满营,后场不严,对手反击一打一个准。
老狐狸布吕克纳的算盘打的很精,瞄准突厥人不稳的左翼,稳住后防的同时快速推进找9号科勒这个高点,60分钟内,占净优势。
然而大马士革钢刀,在敌人最得意时,猛地出鞘。
利刃一出,谁与争锋。
估计坦克兵切赫再去接1000次这样的传中球,都不会脱手,但今天,他就是巴特斯附体。
图兰是好样的,上一场是他最后一刻的冷箭,给本队留了点球决战的希望,今天又是他的后点包抄,吹响了反击的号角。
nihat是好样的,在最关键的时刻本能一捅把不是机会的机会变成了一个进球,最后一刻,一记明月弯刀似的弧线球,准如激光导弹,打入球门死角。
大阿尔腾托普是好样的,上演助攻帽子戏法,硬生生把已队从死亡的边缘拉了回来。
热血的土耳其人,今天,你们是欧洲之王! |
2008年06月10日 星期二 23:57
桃源云漫 故道小村在
红颜轻弹 古曲远传
一梦十寒 仙山中觅情难
望断天涯 少年叹
并双剑 舞云端
奢求一世不孤单
人去留 心还在
仙语不绝绕群山
白鹤飞 黄沙漫
红尘一笑一悠然
此生尽
来世还要续仙凡
桃源云漫 故道小村在
红颜轻弹 古曲远传
一梦十寒 仙山中觅情难
望断天涯 少年叹
并双剑 舞云端
奢求一世不孤单
人去留 心还在
仙语不绝绕群山
白鹤飞 黄沙漫
红尘一笑一悠然
此生尽
来世还要续仙凡
并双剑 舞云端
奢求一世不孤单
人去留 心还在
仙语不绝绕群山
白鹤飞 黄沙漫
红尘一笑一悠然
此生尽
来世还要续仙凡
续仙凡 |
2008年06月08日 星期日 20:49
6月7日,连绵大雨。我不知道广东竟然有雨季,正如当初不知道北京有沙季一样。徐闻的螃蟹群在上树,映秀的直升机找不到,雨声终日不停,我略感不安。弹尽粮绝,吃上一餐固体食物恰好是在24小时前。但饥饿感并不强烈,只是把一个金红色的可乐罐子从枕畔扔到床尾,以免万一引来雷电被击中头部。而后给老妈、老弟、老兄、老妹等多人发去同一条短信:“《三体II》的含金量使我的无语程度达到了有生以来的最高级别。”“能博学(这种博学远不仅是对"过往"\"当下"\"已知"的吸纳)到让我钦佩的人如刘慈欣者,极其稀少。”
我估算了下:《三体II》的篇幅大致在38万字左右,从昨天19:30读到今天16:30,期间从0:00到10:30为昏睡时间(工作太累,并非书本乏味),阅读时间为10个半小时,其间上了两次厕所,关了一次窗:即总共下床3次。我不知道自己的阅读效率究竟是提高还是降低了。上一次是在03或者04年,坐在学生寝室的床上,也是如现在这样垫着一方折叠小桌读或可视为《三体》前传的《球状闪电》,通宵沉醉,东方之既白而不察。这样的幸福感已经久违。
在我印象中,《三体》应该是诞生于本土的第一部架设在文明史层面的SF长篇——这对于缺乏彼岸观的中国人而言相当难得。大刘曾说过,他自信《超新星纪元》无论从文学上还是科幻上都是其“顶峰之作,以后也没有可能超越。”然而如今这句话已经被他自己那无可阻遏的才华所推翻。自然《超新星纪元》也是文明史的角度,只是它不够长,或许也还不够成熟;而我天生更青睐复杂谨严的系统工程。而大刘对自己作品的看法也与我相去不近:我曾当面表达过对其未发表作品(有一定政治敏感性)《西洋》的敬意,然而他却认为那只配给阿越的《新宋·十字》提鞋。为此我曾数次在书店刻意搜寻并翻阅《新宋·十字》,结果发现全然读不下去。
多年前读到大刘发表的第一篇作品时,只当千万个平庸的作者之一忽略了过去——在我的心中唯老王是永远的神祗。直到《乡村教师》的出现让我看到了另一个擎天柱。
老王是哲学的,而大刘是科技的;或者说老王是科学的,而大刘是工程的。强烈的技术导向风格在《三体II》中被发扬得淋漓尽致,而在这样的快感之外,还有更多更多难以穷尽的财富。记得一位私访过大刘的朋友提起过:一席话,便感到大刘“无所不知”;作为大刘的老读者,对这点我有着一种发自“同类”的体会和确信;而在阅读《三体II》的过程中,这种体会和确认便以更强烈的程度卷土重来,使我对那位朋友的评价感同身受。在这体系严整宏大、结构精密回环的行文之中,囊括了太多才智、识见、思辨、瞻望以及传承自前人的精髓:当我读到业已所知的,便不假思索地会心一笑,由赞叹的微笑所带来的愉悦与想要获取更多的渴望感贯穿了这阅读过程的始终。
我甚至在想:如此精神富足、才华横溢的作家是否应当囊入国宝之列?尤其在这个没有抬头看星星习惯的,地球上现实、世俗程度最高的民族之内,这样睿智深远、胸怀广博的人算不算是国宝?声明我绝无捧杀之意。
工作的第三年,身边的人多已渐渐熄灭了对SF的兴趣;无论是在全球还是国内,SF的黄金时代已随太阳风帆的远行而落幕。制作精良的SF电影仍然斩获巨亿票房,但其粉丝的热爱并非源自SF本身的意义,而是由于视听效果的精彩。当我努力码字赚取着可以肯定比大刘作品单字高出许多的稿费之时,我仍不愿意承认:现实比理想更重要,我们只能活在这青天白日下、琐屑俗世中(那些多年来每个周末都在银厂沟溪水中边泡脚边打麻将,在本次地震中却被瞬间合二为一的两山夹成薄片化石的普通市民或许同意我这观点);我非常愿意承认的则是:我的作品仅仅用于换钱,而不存在其他任何价值,是为有价之垃圾。我感激刘慈欣先生:那位被我们的社会遗落于深山老厂中的平凡工程师,在环境冷清而人事污浊之所凭借满腔热情与我们无私地分享着他那珍贵的宝藏。我为与他生于同一时代而深感幸运,更为幸运的则是:他仍年富力强,才智的火山喷发正旺。
曾经我对朋友说过,没有[第九交响乐],贝多芬的成就与历史评价断不及莫扎特,因为后者是哲学的,前者是技术的;虽则前者宏大,形式上具有更强的感染力;后者的理性与简单中却蕴涵着更接近本质的犀利。曾经我也对一个同来参加SF作家见面会的电子系男生暗暗不屑,因为他认为大刘作品场面恢弘、技术描绘详密,因此超越老王作品远甚。然而今天我可以认为:[第九交响乐]已经横空出世——它那最初的章节(《三体I》),曾使我误以为它是大刘作品商业化转型的开端,但是我错了。此外,尽管许多人都针对SFW打击电子版的声明发出叹息,认为若有成熟的市场机制,必能使《三体》这样优秀的作品转化为以电影为首的文化产品从而保证创作者本人收获合理的回报;但我不得不遗憾地认为当前的技术根本无法保证忠实于原著的电影《三体II》取得无论艺术还是商业方面的成功,无论拉上库布里克、斯皮尔伯格,还是卢卡斯、卡梅隆、迈克尔贝来当导演。看完《三体II》自会明白这一点。
雨仍未停,肚子却已空了足足26个小时;暮色已然降临,是该出门的时候了。不知我是不是除了作者与编辑外第一个通读《三体II》的读者?临走前最后说一声:大刘刘慈欣先生,我发自衷心地赞美你,虽然这与你无关。
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如果我的心是一朵莲花,正中擎出一枝点亮的蜡,荧荧虽则单是那一剪光,我也要它骄傲的捧出辉煌。
不怕它只是我个人的莲灯,照不见前后崎岖的人生——浮沉它依附着人海的浪涛,明暗自成了它内心的秘奥。
单是那光一闪花一朵——像一叶轻舸驶出了江河——宛转它飘随命运的波涌,等候那阵阵风向远处推送。
算做一次过客在宇宙里,认识这玲珑的生从容的死,这飘忽的途程也就是个——也就是个美丽美丽的梦。
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2008年05月27日 星期二 08:40
构建全长cDNA文库分为噬菌体文库和质粒文库,二者大同小异。无论怎样,应当注意如下几个方面:
一、保证获得数量足够的高质量的起始RNA。构建cDNA文库要求的RNA量比做RACE和Northern blot的要多,在材料允许的情况下一般的试剂盒均推荐采用纯化总mRNA后进行反转录,这比直接采用总RNA进行反转录而构建的cDNA文库好,虽然后者也并不是不能做。老版本CLONTECH的SMART 4的中级柱子要求纯化后的总mRNA量最好在0.05-0.5微克左右,这就要求起始总RNA量较多。虽然有的试剂盒声称少至几十个纳克的总RNA也可以构建cDNA文库,但这是针对材料极为稀缺者而言,但起始RNA太少还是会或多或少影响文库构建成功的风险和文库的代表性。至于RNA的质量,如果采用纯化总mRNA后反转录,则对总RNA的杂质方面要求稍松,但对RNA的完整性则一丝不苟,要求未降解。如果直接采用总RNA进行反转录,则对总RNA的质量要求非常高,不仅要求RNA相当完整而无降解,而且要求多酚、多糖、蛋白、盐、异硫氰酸胍等杂质少,最好是试剂盒抽提的。
二、反转录成功与否及反转录效率是关键中的关键。这是构建cDNA文库中最贵的一步,也是核酸质变的一步,它将易降解的RNA变成了不易降解的cDNA。反转录不成功,说明一次文库方案的夭折。反转录效率不高表现在一是部分mRNA被反转录了,但还有相当一部分本该反转录的mRNA未被反转;二是只有少部分mRNA被反转录通了即达到帽子结构最近处,而很大一部分mRNA没有反转录完全,总的全长cDNA太少,这就难以构建好的全长cDNA文库。少量程度的mRNA降解或反转录不完全在SMART 4等试剂盒及手工方法构建中对文库的滴度影响不大,但对文库的全长性则有很大影响。Invitrogen公司基于去磷酸化、去帽、RNA接头连接后再反转录的新技术(可参考其GeneRacer说明书)从原理上是保证最终获得全长cDNA的最好方法,但对mRNA的完整性要求非常高,理论上讲必须是带有帽子结构和Poly A结构的全长mRNA且反转录完全,才能进入文库中。反转录完成后点样检测cDNA的浓度及分子量分布是很重要的。
三、反转录后至包装到噬菌体外壳蛋白之前的诸多步骤的操作相对容易,但其中的层析柱cDNA分级很关键。这一步稍不注意会影响成功性或影响获得的cDNA的片段分布特点。这一步的操作要小心,尤其要在加入cDNA之前通过反复悬浮和试滴保证柱子能正常工作,cDNA的加入和收集要精力集中。获得的每一级的cDNA量很少,检测时带型很暗,所以要用新鲜做的透明薄胶检测,根据检测结果一定要舍弃太短的cDNA(一般400bp以下就不要了,因为短片段太多会严重影响后面的连接转化效果及文库质量)。
四、噬菌体文库或质粒文库均对载体与cDNA的连接效率要求很高,也对连接产物转染或转化大肠杆菌的效率要求很高。连接效率高低直接关系到文库构建是否成功,更要注意的是文库连接与一般的片段克隆的连接不一样。一般的片段克隆连接是固定长度的载体与固定长度的目的DNA连接,而文库连接是固定长度的载体与非固定长度的目的DNA连接,目的基因cDNA长的有10kb以上,短的只有500bp或更短。一系列长度不等的cDNA与载体在一起连接的结果,不同长度cDNA的连接效率就不一样。有的专家的经验是,根据分级结果,有意识地将长度不同的cDNA群分别与载体连接,再分别转化或转染大肠杆菌,分别完成滴度检测,最后将不同长度级别的文库混合在一起供杂交筛选。
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