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一、生物碱沉淀试剂: 1.碘化铋钾(Dragendorff)试剂:取次硝酸铋3g溶于30%硝酸(比重1.18)17ml中,在搅拌下慢慢加碘化钾浓水溶液(27克碘化钾溶于20ml水),静置一夜,取上层清液,加蒸馏水稀释至100ml。 附:改良的碘化铋钾试剂: 甲液:0.85g次硝酸铋溶于10ml冰醋酸,加水40ml。 乙液:8g碘化钾溶于20ml水中。 溶液甲和乙等量混合,于棕色瓶中可以保存较长时间,可作沉淀试剂用,如作层析显色剂用,则取上述混合液1ml与醋酸2ml,混合即得。 目前市场上碘化铋钾试剂可直接供配制:7.3g碘化铋钾,冰醋酸10ml,加蒸馏水60ml。 2.碘化汞钾(Mayer)试剂:氯化汞1.36g和碘化钾5g各溶于20ml水中,混合后加水稀释至100ml。 3.碘一碘化钾(Wagner):试剂:1g碘化钾液于50ml,加热,加2ml醋酸,再用水稀释至100ml。 4.硅钨酸试剂:5g硅钨酸溶于100ml水中,加盐酸少量至pH2左右。 5.苦味酸试剂:1g苦味酸溶于100ml水中。 6.鞣酸试剂:鞣酸1g加乙醇1 ml溶解后再加水至10ml。 7.碱酸铈——硫酸试剂:0.1g硫酸铈混悬于4ml水中,加入1g三氯醋酸,加热至沸,逐滴加入浓硫酸至澄清。 二、苷类检出试剂:(一)糖的检出试剂:1.碱性酒石酸铜(Fehiling)试剂:本口分甲液与乙液,应用时取等量混合。 甲液:结晶硫酸酮6.23g,加水至100ml。 乙液:酒石酸钾钠34.6g,及氢氧化钠10g,加水至100ml。 2.ɑ-萘酚(Molisch)试剂。 甲液:ɑ-萘酚1g,加75%乙醇至10ml。 乙液:浓硫酸 3.氨性硝酸银试剂:硝酸银1g,加水20ml溶解,注意滴加适量的氨水,随加随搅拌,至开始产生的沉淀将近全溶为止,过滤。 4.ɑ-去氧糖显色试剂 (1)三氯化铁冰醋酸(Keller-Kiliani)试剂 甲液:1%三氯化铁溶液0.5ml,加冰醋酸至100ml。 乙液:浓硫酸。 (2)占吨氢醇冰醋酸(Xanthydrol)试剂:10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸(含1%的盐酸中) (二)酚类1.三氯化铁试剂:5%三氯化铁的水溶液或醇溶液。 2.三氯化铁一铁氰化钾试剂: 甲液:2%三氯化铁水溶液 乙液:1%铁氰化钾水溶液 应用时甲液、乙液等体积混合或分别滴加。 3、4一氨基氨替比林一氨氰化钾(Emerscn)试剂: 甲液:2%4-氨基安替比林乙醇液 乙液:3%铁氰化钾水溶液,(或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液)。 4.重氮化试剂:本试剂系由对硝基苯胺和亚硝酸钠在强酸下经重氮化作用而成,由于重氮盐不稳定很易分解,所本试剂应临用时配制。 甲液:对硝基苯胺0.35g,溶于浓盐酸5ml,加水至50ml。 乙液:亚硝酸钠5g,加水至50ml 应用时取甲、乙液等量在冰水浴中混合后,方可使用。 5.Gibb试剂: 甲液:0.5%2,6-二氯苯醌-4氯亚胺的乙醇溶液。 乙液:硼酸一氯化钾一氢氧化钾缓冲液(pH9.4)。 [注]试剂配制法中:1.水是指蒸馏水;2.不指出溶剂的即为水溶液;3.醇指95%;4.试剂配制后应澄清,如不澄清可过滤。 (三)内酯、香豆素类1.异羟肟酸铁试剂 甲液:新鲜配制的1N羟胺盐酸盐(M=69.5)的甲醇液。 乙液:1.1N氢氧化钾(M=56.1)的甲醇液 丙液:三氯化铁溶于1%盐酸中的浓度为1%的溶液。 应用时甲、乙、丙三液体按次序滴加,或甲、乙两液混合滴加后再加丙液。 2.4-氨基安替比林一铁氰化钾试剂(见二一(二)-3)。 3.重氮化试剂:(见二一(二)-4)。 进行2、3试验时样品应先加3%碳酸钠溶液加热处理,再分别滴加试剂。 4.开环一闭环试剂 甲液:1%氢氧化钠溶液。 乙液:2%盐酸溶液。 (四)黄酮类:1.盐酸镁粉试剂:浓盐镁和镁粉 2.三氯化铝试剂:2%三氯化铝甲醇溶液 3.醋酸镁试剂:1%醋酸镁甲醇溶液 4.碱式醋酸铅试剂:饱和碱式醋酸铅(或饱和醋酸铅)水溶液。 5.氢氧化钾试剂:10%氢氧化钾水溶液。 6.氧氯化锆试剂:10%氧氯化锆甲醇溶液。 7.锆一枸橼酸试剂: 甲液:2%氧氯化锆甲醇液。 乙液:2%枸橼酸甲醇液。 (五)蒽醌类:1.氢氧化钾试剂:10%氢氧化钾水溶液。 2.醋酸镁试剂:105醋酸镁甲醇溶液。 3.1%硼酸试剂:1%硼酸水溶液。 4.浓硫酸试剂:浓硫酸。 5.碱式醋酸铅试剂:(见二一(四)一4)。 (六)强心苷类1.3,5-二硝基苯甲酸(Kedde)试剂。 甲液:2%3,5-二硝基苯甲酸甲醇液。 乙液:1N氢氧化钾甲醇溶液: 应用前甲、乙两液等量混合。 2.碱性苦味酸(Baljet)试剂: 甲液:1%苦味酸水溶液。 乙液:10%氢氧化钠溶液。 3.亚硝基铁氰化钠一氢氧化钠的(Legal)试剂: 甲液:吡啶 乙液:0.5%亚硝基铁氰化钠溶液。 丙液:10%氢氧化钠溶液 (七)皂苷类:1.溶血试验:2%血球生理盐水混悬液:新鲜兔血(由心脏或耳静脉取血),适量,用洁净小毛刷迅速搅拌,除去纤维蛋白并用生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后,量取沉降红血球用生理盐水配成2%混悬液,贮冰箱内备用(贮存期2~3天)。 2.醋酐一浓碱酸(Liebermann)试剂: 甲液:醋酐。 乙液:硫酸。 3.浓硫酸试剂,浓硫酸。 (八)含氰苷类:1.苦味酸钠试剂:适当大小的滤纸条,浸入苦味酸饱和水溶液;浸透后取出晾干,再浸入10%碳酸钠水溶液内,迅速取出晾干即得。 2.亚铁氰化铁(普鲁士兰)试剂: 甲液:10%氢氧化钠液。 乙液:10%硫酸亚铁水溶液,用前配制。 丙液:10%盐酸。 丁液:5%三氯化铁液。 三、萜类、甾体类检出试剂 1.香草醛一浓硫酸试剂:5%香草醋浓硫酸液(或0.5g香草醛溶于100ml硫酸一乙醇(4:1)中)。 2.三氯化锑(Carr-Price)试剂:25g三氯化锑溶于15g氯仿中(亦可用氯仿或四氯化碳的饱和溶液)。 3.五氯化锑试剂:五氯化锑一氯仿(或四氯化碳)1:4,用前新鲜配制。 4.醋酐一浓硫酸试剂:(见二一(七)一2)。 5.氯仿一浓硫酸试剂: 甲液:氯仿(溶解样品)。 乙液:浓硫酸。 6.间二硝基苯试剂: 甲液:2%间二硝基苯乙醇液。 乙液:14%氢氧化钾甲醇液。 用前甲、乙两液等量混合。 7.三氯醋酸试剂:3.3g三氯醋酸溶于10ml氯仿,加入1~2溶过氧化氢。 四、鞣质类检出试剂:1.三氯化铁试剂 2.三氯化铁一铁氰化钾试剂 3.4-氨基安替比林一铁氰化钾试剂 4.明胶试剂:10g氯化钠,1g明胶,加水至100ml。 5.醋酸铅试剂:饱和醋酸铅溶液。 6.对甲基苯磺酸试剂:20%对甲基苯磺酸氯仿溶液。 7.铁铵明矾试剂:硫酸铁铵结晶(FeNH4(SO4)12H2O)lg,加水至100ml。 五、氨基酸多肽、蛋白质检出试剂1.双缩脲(Biuret)试剂: 甲液:1%硫酸铜溶液。 乙液:40%氢氧化钠液。 应用前等量混合。 2.茚三酮试剂:0.3g茚三酮溶于正丁醇100ml中,加醋酸3ml(或0.2g茚三酮溶于100ml乙醇或丙酮中)。 3.鞣酸试剂:(一6) 六、有机酸检出试剂1.溴麝香草酚兰试剂:0.1%溴麝香酚兰(或溴酚兰、或溴甲酚绿)乙醇液。 2.吖啶试剂:0.005%吖啶乙醇液。 3.芳香胺一还原糖试剂,苯胺5g,水糖5g溶于50%乙醇溶液中。 七、其它检出试剂1.重铬酸钾一硫酸 5g重铬酸钾溶于100ml 40%硫酸。 2.萤光素一溴: 甲液:0.1%萤光素乙醇液 乙液:5%溴的四氯化碳溶液。 甲液喷、乙液熏。 3.碘蒸气 4.硫酸液:5%硫酸乙醇液,或15%浓硫酸正丁醇液。或浓硫酸一醋酸(1:1)。 5.磷钼酸、硅钨酸或钨酸试剂:3~10%磷钼酸或钨酸乙醇液。 6.碱性高锰酸钾试剂: 甲液:1%高锰酸钾液。 乙液:5%碳酸钠液,用时等体积混合。 7.2,4-二硝基苯肼试剂:取2,4-二硝基苯肼配成0.2% 2N盐酸溶液或0.1 2%盐酸乙醇液。 |