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在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?

影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括：
1、内标物在样品里混合不好；
2、内标物和样品组分之间发生反应，
3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。进样量应足够小并保持不变，这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠，而色谱固看来也是正常的话，应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是：面积比可变，而峰高比保持相对恒定，
在制作内标标准曲线时应注意什么?

在用内标法做色话定量分析时，先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析，测量峰面积，做重量比和面积比的关系曲线，此曲线即为标准曲线。在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致，因此，在制作标准曲线时，不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速等)，还应注明进样体积和内标物浓度。在制作内标标准曲线时，各点并不完全落在直线上，此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差，在使用过程中应定期进行单点校正，若所得值与平均值的偏差小于2，曲线仍可使用，若大于2，则应重作曲线，如果曲线在铰短时期内即产生变动，则不宜使用内标法定量。
　

二、外标法

用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。此法可分为工作曲线法及外标一点法等。工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线，求出斜率、截距。在完全相同的条件下，准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液，根据待测组分的信号，从标准曲线上查出其浓度，或用回归方程计算，工作曲线法也可以用外标二点法代替。通常截距应为零，若不等于零说明存在系统误差。工作曲线的截距为零时，可用外标一点法(直接比较法)定量。
　　外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样，测得峰面积的平均值，用下式计算样品中i组分的量：

　　　　　W＝A(W)／(A)　　　　　　

　　　式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。(W)及
(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。外标法方法简便，不需用校正因子，不论样品中其他组分是否出峰，均可对待测组分定量。但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。此外，为了降低外标一点法的实验误差，应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。外标法 external standard method 色谱分析中的一种定量方法，它不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。

三、定量分析中怎样选择内标法或外标法(来源：药物分析网）
选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组分），然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液，进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中，进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。

内标法是将一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来计算被测组分的含量。 选择内标物有4个要求：1.内标物应是该试样中不存在的纯物质；2.它必须完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；3.加入内标物的量应接近于被测组分；4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。 内标法的优点是测定的结果较为准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量，有时寻找合适的内标物也有困难。 外标法简便，但进样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到准确的测量结果。

内标与外标都是定量的一种方法而已，至于哪一种方法好与不好不能一概而论，做不同的分析，面对着不同的要求，再加上分析成本分析效率等等问题，我想简单而有效进行定量分析来满足要求才是最重要的。

3、如果你是实验室小量操作，轻轻的颠倒7～8次就好了，没有必要象作鸡尾酒一样用力，否则自讨苦吃哦！
4、如果你的乳化层在水相和氯仿层中间，久久不散，你还可以将分液漏斗平放，小心超声振荡一会儿，会有较好的效果。
5、还有，你可以用：事先配制的、用水饱和的氯仿代替直接使用氯仿，乳化现象会有所好转。

我采用了两种方法一般就可解决：１.沿着管壁加入几滴无水乙醇，先让其从一边开始破乳，慢慢就可都分层！
２.将其倒入烧杯中在水浴中微微加热（盖上玻璃，透一点空隙），然后再放入分液漏斗中静置一般就可分层了，我每次都能将他们很快就萃取开．
3.我还曾用过的方法是深冷冻法，效果不错，方法是：将乳化液倒到烧杯中，在乳化液中加一些水后，放入冰箱的冷冻室过夜，水被冷冻后，取出慢慢融化，就破乳分层了，基夲上无须手忙脚乱。另外也可在乳化液中加含水的氯仿和二氯甲烷混合液后，再深冷冻，如上述方法处理。加热常将不稳定物破坏了。

乳化现象主要是由于所萃取物的酸碱度过强，或者所用溶剂密度过于接近，或者
所萃取溶液有较大的粘度造成的，对于不同原因造成的乳化，我们可以用不同方
法予以消除，下面简单介绍几种常用方法：
1，长时间静置，一般会管用，但对于没有耐心的同学，或者着急赶进度的同学不适用。
2，摇动分液漏斗，使其中液体形成漩涡，等到静置时，大部分泡沫会沉降下来。
3，补加溶剂。这个比较有讲究，当你要的有机溶剂在上层，最好补加密度较小的乙醚，否则就补加密度较大的二氯甲烷或者氯仿。
4，加入乙醇。不用我多说，大家都知道这一招对表面活性剂类型的溶液非常管用，不过一定适可而止，不能多加哦。
5，加入无机盐或其饱和溶液。包括饱和食盐水，硫酸铵，氯化钙等等，刚才师姐已经建议了，不再多说。
6，加酸碱调节水相的pH值，最好使其接近中性。估计这一方法对刚才哪位同学会有帮助，你的体系中有KOH，用稀盐酸或者饱和氯化铵中和一下，估计会好起来。但是这一操作要控制好量，不可加过头，特别是所分离物品种有对酸碱敏感的基7，以上方法还不行，建议将乳化层单独分出，我们用必杀技将其解决！
7.1，将乳化层上离心泵分离，一招见效，永不复发。没有离心泵？别急
7.2，将乳化层在铺有硅藻土的布氏漏斗上抽滤，滤液自然清凉透明，分为两层。不过如果乳化层含有太多的水，抽滤会非常缓慢，并且有可能抽穿滤纸，强烈建议在硅藻土下面垫双层滤纸！

一、准确度和误差
1.准确度   系指测得结果与真实值接近的程度。
2.误差   系指测得结果与真实值之差。
二、精密度和偏差
1.精密度   系指在同一实验中，每次测得的结果与它们的平均值接近的程度。
2.偏差   系指测得的结果与平均值之差。
三、误差和偏差
由于“真实值”无法准确知道，因此无法计算误差。在实际工作中，通常是计算偏差（或用平均值代替真实值计算误差，其结果仍然是偏差）。
四、绝对偏差和相对偏差
绝对偏差 = 测得值－平均值
                绝对偏差
相对偏差 =          ×100%
               平均值
若两份平行操作，设A、B为两次测得值，则其相对偏差如下式计算：
                  A－平均值           A－(A＋B)/2       A－B
相对偏差（%）=          ×100% =          ×100% =        ×100%
                  平均值             (A＋B)/2          A＋B

五、标准偏差和相对标准偏差
1.标准偏差   是反映一组供试品测定值的离散的统计指标。
若设供试品的测定值为Xi，则其平均值为X，且有n个测定值，那么标准偏差为：
1.标准偏差（SD）

SX =             
                  
2.相对标准偏差（RSD）
SX
RSD =    ×100%

六、最大相对偏差
相对偏差   是用来表示测定结果的精密度，根据对分析工作的要求不同而制定的最大值（也称允许差）。
七、误差限度
误差限度   系指根据生产需要和实际情况，通过大量实践而制定的测定结果的最大允许相对偏差。

精密度\精确度：针对结果
分度与精度：针对仪器
比如温度计的分度：分度号代表温度范围，且代表每种分度号的热电偶具体多少温度输出多少伏特的电压或者毫伏的电压。

热电偶的分度号有主要有S、R、B、N、K、E、J、T等几种。其中S、R、B属于贵金属热电偶，N、K、E、J、T属于廉金属热电偶。
S分度号的特点是抗氧化性能强，宜在氧化性、惰性气氛中连续使用，长期使用温度1400℃，短期1600℃。在所有热电偶中，S分度号的精确度等级最高，通常用作标准热电偶；
R分度号与S分度号相比除热电动势大15%左右，其它性能几乎完全相同；
B分度号在室温下热电动势极小，故在测量时一般不用补偿导线。它的长期使用温度为1600℃，短期1800℃。可在氧化性或中性气氛中使用，也可在真空条件下短期使用。
N分度号的特点是1300℃下高温抗氧化能力强，热电动势的长期稳定性及短期热循环的复现性好，耐核辐照及耐低温性能也好，可以部分代替S分度号热电偶；
K分度号的特点是抗氧化性能强，宜在氧化性、惰性气氛中连续使用，长期使用温度1000℃，短期1200℃。在所有热电偶中使用最广泛；
E分度号的特点是在常用热电偶中，其热电动势最大，即灵敏度最高。宜在氧化性、惰性气氛中连续使用，使用温度0-800℃；
J分度号的特点是既可用于氧化性气氛(使用温度上限750℃)，也可用于还原性气氛(使用温度上限950℃)，并且耐H2及CO气体腐蚀，多用于炼油及化工；
T分度号的特点是在所有廉金属热电偶中精确度等级最高，通常用来测量300℃以下的温度。
精度：一、电工仪表的精度等级
电工测量指示仪表在额定条件下使用时，其最大基本误差的百分数称为仪表精度等级a的百分数，即±a%=（ΔXm/Xm）×100%。
其中，ΔXm为最大绝对误差，Xm为仪表的基本量程。
国家标准规定，电压表和电流表的精度等级分0.05、0.1、0.2、0.3、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、5.0等十一级；
功率表和无功功率表的精度等级分0.05、0.1、0.2、0.3、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.5等十级；
频率表的精度等级分0.05、0.1、0.15、0.2、0.3、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、5.0等十一级。
测量时，仪表全量程范围内的指示误差不得超过最大基本误差。
二、对于仪表精度需说明的问题
1.仪表的精度并非测量精度。仪表运用在满刻度偏转时，相对误差较小。
2.要提高测量精度，应从两方面着手：一是选用精度等级高的仪表；二是使仪表尽可能运用在满偏转状态。因此应合理选择仪表的量程。
3.非线性刻度的仪表其示值相对误差不能用上述方式计算。例如，对于万用表电阻档，当指示值Rx=中心值=R0时，测量误差最小。因此，为了减小误差，一般以指针在中心电阻值的0.2～2.5倍之间为宜。